1- Anticuerpos Monoclonales: La Generación de anticuerpos monoclonales murinos dirigidos contra ADN de doble cadena para permitir la realización de ensayos de hibridización no radioactivos. Anticuerpos Monoclonales: Generación de anticuerpos monoclonales que reconozcan de modo específico IgG e IgM humanas para ser utilizados en el serodiagnóstico. La detección de niveles de éstas inmunoglobulinas contra diferentes agentes que producen una respuesta inmunológica ha sido durante años el basamento de la Serología. Tradicionalmente, esta detección se ha llevado a cabo Inmuno - químicamente por medio de anticuerpos anti-humanos desarrollados en mamíferos tales como conejos, cabras o terneros. Estos anticuerpos, conjugados a enzimas, compuestos fluorescentes o reactivos de afinidad, han sido usados para la detección de inmunoglobulinas en un gran número de inmunoensayos como inmunofluorescencia indirecta, ELISA, Western blot y otros. La tecnología de hibridomas podría utilizarse para la obtención de anticuerpos homogéneos que mostrarían afinidad y especificidad constantes y serían una fuente estable en el tiempo de anticuerpos de alta afinidad para ser usados en ensayos de segunda y tercera generación.
2- Hibridomas: La tecnología de hibridomas para la producción de monoclonales representa hoy una importante herramienta para la obtención de una fuente estable de anticuerpos homogéneos. Existe la posibilidad de producir anticuerpos murinos que reaccionen con ADN de doble cadena con secuencia independiente. Estas moléculas serán capaces de discriminar entre doble y simple cadena. Se espera que estos resultados conduzcan a la obtención de un reactivo con carácter universal para ser usado en experimentos de hibridización.
3- Microbiología Molecular: En los últimos años, los laboratorios de investigación en las Subdirecciones de Microbiología y Parasitología han tenido acceso al tremendo desarrollo de la tecnología de ADN recombinante. Esto les ha permitido desarrollar el uso de nuevas herramientas para el diagnóstico y la caracterización molecular de microorganismos. Un número de proyectos de investigación multidisciplinarios permite la aplicación de los fundamentos de la "Epidemiología Molecular" a encuestas o al ejercicio de la Epidemiología convencional. Las áreas en las que se podría contratar investigación son análisis y manipulación de información genética, desarrollo de hibridomas tecnología de anticuerpos monoclonales, producción de antígenos estructurales o de excreción - secreción, producción de anticuerpos (tanto policlonales como monoclonales), inmunógenos, evaluación de sensibilidad antibiótica o antiviral, entre otras.
4- Control Biológico de Vectores: Uso de un preparado biológico (RI) para el control de larvas de mosquito. La transferencia de tecnología para una producción de bioloarvicidas preparados con estadíos pre-parasíticos de nemátodos es posible a mayor escala, así como la Implementación de su siembra en los focos infestados. La tecnología incluye también el uso de especies de peces larvívoros y la aplicación de éstas técnicas en los criaderos es considerablemente más económica que el uso de insecticidas, al tiempo que no causa efectos perjudiciales al ambiente.
5- Tecnología para el diagnóstico rápido de Enfermedades Infecciosas: Métodos para la detección de antígenos y anticuerpos de diferentes generaciones, tales como ELISA, aglutinación por látex, inmunofluorescencia para ser aplizados al diagnóstico de infecciones agudas causadas por bacterias, virus, parásitos u hongos. Algunas técnicas ostentan un carácter original como la detección específica de enzimas de Ameba hystolitica o la detección de anticuerpos IgM contra los virus del Complejo Dengue.
6- Laboratorio de Farmacología: Este laboratorio tiene las posibilidades y la versatilidad requeridas para caracterizar completamente la absorción, distribución y eliminación de drogas de uso en el tratamiento de enfermedades infecciosas en pacientes hospitalizados, como método de apoyo a ensayos clínicos. Puede ofrecer servicios de estudios de farmacoquinética comenzando por el diseño del estudio, preparación del protocolo e incluyendo desarrollo y validación de los métodos de ensayo, análisis e interpretación de datos y la preparación de un reporte final. Las técnicas de análisis disponibles son:
- Cromatografía de capa delgada
- Cromatografía líquida de alta presión
- Espectrofotometría
- Ensayo inmunoenzimático
7- Caracterización de antígenos de Mycobacterium Habana por técnicas electroforéticas: Estudios recientes han demostrado que Mycobacterium Habana parece ser la más inmunogénica especie de Mycobacteria, y que es capaz de inducir protección contra Mycobacterium leprae, según estudios experimentales conducidos en ratones. Los estudios por PAGE, Immunoblotting y Electroforesis bidimensional podrán demostrar la composición de los antígenos compartidos con el propósito de expresarlos posteriormente y obtener una vacuna que sea efectiva contra ambas especies.
8- Cepa recombinante: Desarrollo de una cepa recombinante de BCG a través de clonaje de genes de Mycobacterium Habana que confieran inmunidad tanto para Lepra como para Tuberculosis. La información existente permitirá el establecimiento de una librería genómica de Mycobacterium Habana capaz de expresar las proteínas de este microorganismo que confieren protección tanto para lepra como para tuberculosis. Estos genes pueden posteriormente subclonarse en BCG.
9- Tecnología de genes para la detección de mycoplasmas asociados al SIDA y su papel en la progresión de la infección por VIH en una cohorte de pacientes: Especies de Mycoplasma han sido reportadas como agentes infecciosos que pudieran jugar un papel clave en la compleja patogénesis del SIDA. Algunos estudios han demostrado que Mycoplasma es en realidad un significativo candidato cuya coinfección pudiera acelerar la aparición de SIDA clínico en personas infectadas con VIH. Mediante el uso de técnicas muy sensibles y específicas como la hibridización de ácidos nucleicos y la RCP se pudiera revelar la significación de Mycoplasma en el curso evolutivo del SIDA.
10- Análisis de variabilidad genética entre algunos aislamientos de Dengue 2 mediante RNnase A mismatch cleavage: La determinación de la variabilidad genética de virus Dengue es crucial para desarrollar estrategias de control para una enfermedad que se está extendiendo cada día más en el continente. El método RNAse A mismatch cleavage ha demostrado ser un procedimiento técnico simple para la clasificación genética de algunos virus de ARN. Los estudios sobre las variaciones genéticas de las cepas circulantes de Dengue podrían aportar datos importantes sobre la evolución molecular y los patrones específicos relacionados con la severidad de la enfermedad.
11- Respuesta Humoral y Celular a Péptidos Sintéticos de Proteínas prM y NS1 del Virus Dengue 2: Se ha obtenido alguna respuesta protectora en ratones a través de la inmunización con proteínas E, NS1 y prM naturales y recombinantes de Dengue. Se han realizado esfuerzos significativos para localizar los epitopes antigénicos protectores de regiones específicas de la Proteína E; pero pocos estudios han sido conducidos utilizando las proteínas NS1 y prM. Es necesario definir y producir Péptidos correspondientes a determinantes de células B sobre proteínas prM y NS1 y, después de acoplarlos a un portador proteico, estudiar su inmunogenicidad y eficacia protectora en ratones y estudiar también los Péptidos sintéticos que pueden actuar como determinantes de células T en ensayos de proliferación "in vitro"
12- Caracterización de la respuesta serológica de pacientes VIH seropositivos cubanos usando Péptidos sintéticos correspondientes con el Loop Hipervariable V3 de VIH-1 y la Glicoproteína de envoltura gp 120: Estudios longitudinales en cohortes de individuos infectados por VIH han indicado que la condición clínica de estabilidad se asocia frecuentemente a la presencia de altos Títulos de anticuerpos neutralizantes. Estos anticuerpos parecen estar dirigidos contra la glicoproteína de la envoltura de VIH gp120 y específicamente contra un segmento de 8 aminoácidos en una región comúnmente denominada como dominio neutralizante o loop V3.
13- Virus Sincitial Respiratorio: Análisis de la variabilidad genética del gene G mediante la técnica de mismatch en búsqueda de una cepa candidata para vacuna. El genoma del virus RS es una ARN de simple cadena negativa que se transcribe en ARNm poliadenilado a partir de un simple promotor localizado en el extremo 3'. El método de RNAse A mismatch cleavage permitirá obtener información genética clasificadora útil para la selección de un candidato a vacuna.
14- Caracterización de agentes virales aislados durante la Epidemia Cubana de Neuropatía: La Neuropatía Epidémica Cubana ha sido declarada por la OMS como una enfermedad emergente. A pesar de todo el trabajo de investigación conducido hasta ahora, no se ha logrado una caracterización completa, aún cuando existen evidencias de su asociación con factores tóxicos y nutricionales. En los estudios virológicos realizados, se obtuvieron dos aislamientos a partir de muestras de líquido cefalorraquídeo y los mismos produjeron un efecto citopatogénico en células VERO, a tipo de enterovirus o Coxsackie. Se encontraron evidencias de epitopes compartidos por estructuras del Sistema Nervioso por lo que esos virus podrían actuar en la Patogenia como ocurre en otras enfermedades autoinmunes. El suero de los pacientes reaccionaba con estructuras neurales. Estos aislamientos virales requieren ser más ampliamente caracterizados por métodos de Biología Molecular. |